奶茶中茶多酚含量測定方法的優(yōu)化

茶多酚是茶葉中有保健功能的主要成份之一。 研究表明茶多酚有抗衰老、緩解過敏、助消化、防輻射、護(hù)齒、養(yǎng)顏等功效，并在癌癥、高血壓、動(dòng)脈硬化、高血糖、中風(fēng)、血栓、哮喘、便秘、腹瀉等 疾病的治療上也有積極的作用。因此，食品中茶多酚 的含量和形態(tài)被越來越多的消費(fèi)者關(guān)注。奶茶是將 茶和奶混合的飲料，兼具牛奶和茶的雙重營養(yǎng)。近年 來，我國奶茶行業(yè)高速發(fā)展，熱度持續(xù)上漲，大大小小的奶茶品牌隨處可見，但是在質(zhì)量上卻參差不齊， 其中茶多酚含量作為衡量奶茶品質(zhì)重要指標(biāo)。GB/T 21733—2008《茶飲料》規(guī)定奶茶中茶多酚含量≥200 mg/kg。

GB/T 21733—2008中采用酒石酸亞鐵比色法測定奶茶中茶多酚含量，但是在實(shí)際操作中存在諸多困難。針對奶茶飲料、果汁茶飲料等較渾濁的樣液，國標(biāo)方法選取95%乙醇溶液作為沉淀劑，然而在實(shí)際 檢測過程中發(fā)現(xiàn)在加入95%乙醇溶液后，蛋白質(zhì)等雜 質(zhì)沉淀效果并不理想，濾紙過濾緩慢，濾液渾濁，背景吸光度高，無法進(jìn)行準(zhǔn)確測定。杜淑霞等[9]指出丙 酮有破乳和沉淀蛋白的作用，在加入一定量的鹽酸后 可促進(jìn)其作用，縮短澄清時(shí)間，加快過濾速度。梁瑞婷等選用4%乙酸溶液作為沉淀劑，測定20種不同的 奶茶飲料，大多奶茶飲料過濾速度快，濾液澄清。但是過量的酸會(huì)降低緩沖鹽的緩沖效果，影響測定液的 pH，導(dǎo)致測定結(jié)果偏低，且偏低的程度隨著乙酸用量 的增大而增大。試驗(yàn)在借鑒前人方法的基礎(chǔ)上，以酒石酸亞鐵比色法為基本方法，通過改變不同種類、不同劑量的沉淀劑優(yōu)化前處理效果，提高奶茶中茶多酚含量的準(zhǔn)確度。

儀器、材料和試劑

水浴鍋；

離心機(jī)；

分光光度計(jì)（UV-1500，上海美析儀器有限公司）。

茶多酚（≥98%，上海源葉生物科技有限公司）；

無水硫酸鈉、丙酮、乙腈、鹽酸、無水乙醇（均為分析純）。

酒石酸亞鐵溶液：稱取0.1 g硫酸亞鐵（分析純）和0.5 g酒石酸鉀鈉（分析純），用水溶解定容至100mL。

磷酸緩沖溶液：稱取20.3 g無水磷酸氫二鈉（分析純）用純水溶解，稱取1.36 g無水磷酸二氫鉀（分析純）用純水溶解，合并2種溶液并定容至1 000 mL。

試樣的制備

稱取10g充分混勻的樣液，加入8 mL乙腈，加入0.5mL 1%鹽酸，搖勻，靜置10 min，用水定容至25 mL，按6 000 r/min離心5 min。過濾，濾液備用。

茶多酚含量的測定

精確量取2 mL濾液于25 mL容量瓶中，加入4 mL水和5 mL酒石酸亞鐵溶液，充分搖勻，用磷酸鹽緩沖溶液定容至刻度，用1 cm比色皿，在波長540 nm處，以試劑空白為參比，測定其吸光度A 1 。取等量的濾液于25 mL容量瓶中，加入4 mL水，用磷酸鹽緩沖溶液定容至刻度，用1 cm比色皿，在波長540 nm處，以試劑空白為參比，測定其吸光度A 2 。茶多酚含量按式

式中：X為樣品中茶多酚的含量，mg/kg；A 1 為試樣顯色后的吸光度；A 2 為試樣底色的吸光度；V 2 為測定時(shí)吸取試樣體積，mL；V 1 為試樣處理時(shí)的定容體積，mL；M為取樣量，g；1.957，用1 cm比色杯，吸光度等于0.5時(shí)，每毫升茶湯中含茶多酚相當(dāng)于1.957mg。

結(jié)論

取10 g樣品，加入8 mL乙腈和0.5 mL 1%的鹽酸，能有效去除蛋白質(zhì)的干擾，獲得澄清的樣品溶液。樣品溶液加入酒石酸亞鐵后，形成藍(lán)紫色絡(luò)合物，溶液顯色明顯。試驗(yàn)方法回收率在90%~111%之間，平行樣相對標(biāo)準(zhǔn)偏為2.7%~4.4%，與GB/T 21733—2008相比，沉淀現(xiàn)象明顯，過濾速度快，濾液澄清，背景吸光度低，有更好的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。優(yōu)化的方法操作簡便，能有效進(jìn)行奶茶等茶飲料中茶多酚含量的測定。

儀器參數(shù)

UV-1500PC紫外可見分光光度計(jì)

儀器特點(diǎn)

*采用單片微機(jī)控制，128*64位液晶顯示

*寬大的液晶顯示器可顯示多組數(shù)據(jù)

*巨大的內(nèi)存空間，可存儲(chǔ)多組數(shù)據(jù)和曲線

*自動(dòng)調(diào)0、調(diào)100%功能

*波長自動(dòng)調(diào)節(jié)

*光源自動(dòng)切換，濾色片自動(dòng)切換

*寬大樣品池（5mm～100mm）

*具有最多十點(diǎn)標(biāo)樣建標(biāo)準(zhǔn)曲線測量功能

*可通過直接輸入K、B因子建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量測量

*可直接輸入標(biāo)樣和對應(yīng)濃度值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量測量

*可斷電保存測量設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)

*配備通用并行打印接口，可打印標(biāo)題欄、測量數(shù)據(jù)、曲線參數(shù)、曲線標(biāo)準(zhǔn)樣品點(diǎn)和曲線

*配USB接口

*可通過PC軟件控制實(shí)現(xiàn)光譜掃描等更精確和靈活的測量要求

技術(shù)指標(biāo)及基本參數(shù)

*波長范圍： 190～1100nm

*光譜帶寬： 2nm

*波長準(zhǔn)確度：±0.5nm

*波長重現(xiàn)性：≤0.2nm

*透射比準(zhǔn)確度: ±0.3% τ

*透射比重復(fù)性：0.15% τ

*雜散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)

*穩(wěn)定性： 0.001A/h（500nm預(yù)熱后）

*測光方式：透過率、吸光度、濃度、能量

*波長調(diào)節(jié)：自動(dòng)調(diào)節(jié)

*光度范圍： -0.3～3A

*顯示方式： 128*64液晶

*檢測器：進(jìn)口硅光二極管

*光源：進(jìn)口氘燈，進(jìn)口鎢燈

*電源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz

*功率： 120W

*儀器尺寸：480×350×220mm

*主機(jī)凈重： 15Kg

關(guān)于我們

上海美析儀器公司簡介

上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析)，是一家具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測試儀器領(lǐng)域，不斷開發(fā)出先進(jìn)的產(chǎn)品，使美析成為優(yōu)質(zhì)儀器資源的供應(yīng)者。

美析主營光譜類儀器可見分光光度計(jì)、紫外可見分光光度計(jì)、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計(jì)、原子熒光光度計(jì)、ICP 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，目前，我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、無機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。同時(shí)美析利用在產(chǎn)品機(jī)械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計(jì)、電氣應(yīng)用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合市場的最新實(shí)際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。美析的總部及生產(chǎn)基地設(shè)在上海，營銷中心設(shè)在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國內(nèi)外的部分科研單位也進(jìn)行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。為更好的服務(wù)于廣大客戶，美析儀器國內(nèi)設(shè)有 12家辦事機(jī)構(gòu)，度身定制符合您需求的應(yīng)用解決方案，提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務(wù)國內(nèi)用戶的同時(shí)，美析也與 20 多個(gè)國家的分銷機(jī)構(gòu)建立了深度的戰(zhàn)略合作關(guān)系。

及國內(nèi)多項(xiàng)資質(zhì)審查認(rèn)證，并有著多項(xiàng)自行研發(fā)的光譜類專利版權(quán)等等）