可見分光光度法測(cè)定酒石酸泰樂(lè)菌素的含量

引言

酒石酸泰樂(lè)菌素是一種十六元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,在水中溶解度很小,由于其分子中叔胺氮上有孤對(duì)電子,它可以與酸(如酒石酸)形成相應(yīng)的鹽類,提高其在水中的溶解度。酒石酸泰樂(lè)菌素的檢測(cè)方法有微生物檢定法、高效液相色譜法、紫外分光光度法等。近年來(lái),共振光散射光譜法因其靈敏度高、操作簡(jiǎn)便,被廣泛應(yīng)用在生物、醫(yī)藥、環(huán)境等領(lǐng)域,但是還未見該方法在酒石酸泰樂(lè)菌素檢測(cè)中的應(yīng)用?；⒓t是一種熒光素類陰離子染料,已經(jīng)被用于檢測(cè)乳糖酸阿奇霉素、硫酸卡那霉素和阿米卡星,還被作為顯色劑檢測(cè)蛋白質(zhì),但還未見在酒石酸泰樂(lè)菌素檢測(cè)中的應(yīng)用。本團(tuán)隊(duì)研究發(fā)現(xiàn),酒石酸泰樂(lè)菌素中的泰樂(lè)菌素陽(yáng)離子能與虎紅陰離子發(fā)生離子締合反應(yīng)生成有色離子締合物,其最大吸收波長(zhǎng)位于564nm處;二者發(fā)生離子締合反應(yīng),還會(huì)使體系的共振光散射強(qiáng)度增大,譜峰位于315nm 處?；谏鲜鲭x子締合反應(yīng)原理,本工作提出了可見分光光度法測(cè)定酒石酸泰樂(lè)菌素含量的方法,并應(yīng)用于注射用酒石酸泰樂(lè)菌素樣品的分析。

儀器與試劑

F-7000型熒光分光光度計(jì);UV-1500型紫外可見分光光度計(jì)（上海美析儀器有限公司）;FA2204N型電子天平;pHS-3D型酸度計(jì)。

酒石酸泰樂(lè)菌素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:0.1g·L^-1,取適量酒石酸泰樂(lè)菌素標(biāo)準(zhǔn)品,用水溶解和稀釋,搖勻備用。使用時(shí),用水稀釋至所需的質(zhì)量濃度。

虎紅溶液:取適量虎紅,加水稀釋,配制成1×10-4mol·L^-1 和5×10-4mol·L^-1 虎紅溶液,分別供共振光散射光譜法和可見分光光度法使用。

Clark-Lubs(克拉克-魯布斯)緩沖溶液:取適量0.1mol·L^-1鄰苯二甲酸氫鉀溶液、0.1mol·L^-1鹽酸溶液以及 0.1mol·L^-1 氫氧化鈉溶液,配制 pH3.0和pH3.4的 Clark-Lubs緩沖溶液,分別供共振光散射光譜法和可見分光光度法使用。

酒石酸泰樂(lè)菌素標(biāo)準(zhǔn)品純度不小于98.5%;虎紅、鄰苯二甲酸氫鉀、鹽酸、氫氧化鈉均為分析純;試驗(yàn)用水為去離子水。試驗(yàn)用樣品為2批市售的不同產(chǎn)地的注射用酒石酸泰樂(lè)菌素(標(biāo)示量為2g·瓶^-1)。

可見分光光度法

將樣品原液用超純水稀釋2.5倍,得到樣品稀釋液。分取1.00mL 樣品稀釋液、0.75mLpH3.4Clark-Lubs 緩 沖 溶 液 和 2.50mL5×10-4mol·L-1虎紅溶液置于10mL比色管中,混合后于室溫反應(yīng)30min,用水稀釋至刻度,作為測(cè)定溶液;取0.75mLpH3.4Clark-Lubs緩沖溶液和2.50mL5×10-4mol·L-1虎紅溶液置于10mL比色管中,混合后于室溫反應(yīng)30min,用水稀釋至刻度,得到空白溶液。將測(cè)定溶液和空白溶液分別置于1cm 比色皿中,均以水作參比,在564nm 處測(cè)量空白、測(cè)定溶液的吸光度 A0 和 A,計(jì)算吸光度差值 ΔA=A-A0。

儀器參數(shù)

UV-1500PC紫外可見分光光度計(jì)

儀器特點(diǎn)

*采用單片微機(jī)控制，128*64位液晶顯示

*寬大的液晶顯示器可顯示多組數(shù)據(jù)

*巨大的內(nèi)存空間，可存儲(chǔ)多組數(shù)據(jù)和曲線

*自動(dòng)調(diào)0、調(diào)100%功能

*波長(zhǎng)自動(dòng)調(diào)節(jié)

*光源自動(dòng)切換，濾色片自動(dòng)切換

*寬大樣品池（5mm～100mm）

*具有最多十點(diǎn)標(biāo)樣建標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量功能

*可通過(guò)直接輸入K、B因子建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量測(cè)量

*可直接輸入標(biāo)樣和對(duì)應(yīng)濃度值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量測(cè)量

*可斷電保存測(cè)量設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)

*配備通用并行打印接口，可打印標(biāo)題欄、測(cè)量數(shù)據(jù)、曲線參數(shù)、曲線標(biāo)準(zhǔn)樣品點(diǎn)和曲線

*配USB接口

*可通過(guò)PC軟件控制實(shí)現(xiàn)光譜掃描等更精確和靈活的測(cè)量要求

技術(shù)指標(biāo)及基本參數(shù)

*波長(zhǎng)范圍： 190～1100nm

*光譜帶寬： 2nm

*波長(zhǎng)準(zhǔn)確度：±0.5nm

*波長(zhǎng)重現(xiàn)性：≤0.2nm

*透射比準(zhǔn)確度: ±0.3% τ

*透射比重復(fù)性：0.15% τ

*雜散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)

*穩(wěn)定性： 0.001A/h（500nm預(yù)熱后）

*測(cè)光方式：透過(guò)率、吸光度、濃度、能量

*波長(zhǎng)調(diào)節(jié)：自動(dòng)調(diào)節(jié)

*光度范圍： -0.3～3A

*顯示方式： 128*64液晶

*檢測(cè)器：進(jìn)口硅光二極管

*光源：進(jìn)口氘燈，進(jìn)口鎢燈

*電源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz

*功率： 120W

*儀器尺寸：480×350×220mm

*主機(jī)凈重： 15Kg

關(guān)于我們

上海美析儀器公司簡(jiǎn)介

上海美析儀器有限公司(以下簡(jiǎn)稱美析)，是一家具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測(cè)試儀器領(lǐng)域，不斷開發(fā)出先進(jìn)的產(chǎn)品，使美析成為優(yōu)質(zhì)儀器資源的供應(yīng)者。

美析主營(yíng)光譜類儀器可見分光光度計(jì)、紫外可見分光光度計(jì)、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計(jì)、原子熒光光度計(jì)、ICP 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，目前，我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、無(wú)機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。同時(shí)美析利用在產(chǎn)品機(jī)械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計(jì)、電氣應(yīng)用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合市場(chǎng)的最新實(shí)際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。美析的總部及生產(chǎn)基地設(shè)在上海，營(yíng)銷中心設(shè)在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國(guó)內(nèi)外的部分科研單位也進(jìn)行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。為更好的服務(wù)于廣大客戶，美析儀器國(guó)內(nèi)設(shè)有 12家辦事機(jī)構(gòu)，度身定制符合您需求的應(yīng)用解決方案，提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務(wù)國(guó)內(nèi)用戶的同時(shí)，美析也與 20 多個(gè)國(guó)家的分銷機(jī)構(gòu)建立了深度的戰(zhàn)略合作關(guān)系。