蜂膠軟膠囊中總黃酮測定方法
引言
蜂膠是由蜜蜂，特別是工蜂，從植物的樹膠、樹脂中采集，并與上顎腺、蠟腺等分泌物混合形成 的具有黏性的固體膠狀物?，F(xiàn)代研究結果表明，蜂膠含有維生素、酚類、蓓烯類、黃酮類化合物等多種營養(yǎng)保健成分。在蜂膠的眾多活性物質中，黃酮類物質是最為關鍵的成分之一，它具有抗菌、殺毒、 消炎止痛、降血脂、促進機體組織再生和增強機體免疫能力等功效。近年來，蜂膠產(chǎn)品在市場上受到了廣泛的關注和認可，其種類也日益豐富，主要以膠囊形式呈現(xiàn)。蜂膠中主要活性成分為黃酮類化合物，已成為研究熱點，且市售的蜂膠膠囊類產(chǎn)品均以總黃酮含量作為評價指標。黃酮類化合物的測定有多種方法，如液相色譜法﹑分光光度法等，液相色譜法可以測定單一的黃酮成分，分光光度比色法可以測定黃酮成分的總量。 紫外分光光度法被廣泛應用于測定蜂膠制品中的總黃酮含量，因為它具有操作簡便、準確度高且易于實施的特點，因此深受廣大研究者的青睞。
實驗方法：根據(jù)《蜂膠中總黃酮含量的測定方法分光光度比色法》（GB/T 20574—2006），利用分光光度比色法對蜂膠軟膠囊中的總黃酮進行定量分析。
試劑
蘆丁標準品（含量95.5%，上海安譜璀世標準技術服務有限公司，批號 2251131）；
無水乙醇、硝酸鋁、95% 乙醇、醋酸鉀（分析純，南京化學試劑有限公司）
儀器
UV-1800紫外可見分光光度計（上海美析儀器有限公司）；
超聲波清洗儀；
高速臺式離心機；
BT25S 十萬分之一電 子天平、BSA224S-CW 電子天平。
試樣的制備
稱取蜂膠軟膠囊內容物0.5g（精確至1mg）于燒杯中，加入95%乙醇約30 mL，室溫下超聲提取20min，將溶液轉移至50mL的容量瓶中，加入95%乙醇至刻度線，混合均勻后進行過濾，棄去初濾液， 收集濾液待測。準確吸取1.0mL待測溶液于50mL容量瓶中，分別加入1.0mL硝酸鋁溶液和1.0mL醋酸鉀溶液，加95%乙醇至刻度，搖勻，靜置10min，3 000 r·min-1離心3min，取上清液待測?？瞻讓嶒灳芪?.0mL待測溶液于50mL容量瓶中，加95%乙醇至刻度，搖勻。用1cm比色皿，在415nm以空白試液作參比，測定樣品吸光度。
標準溶液制備
稱取10.50mg蘆丁標準品（含量95.5%）于50mL容量瓶中，用無水乙醇溶解，并定容至刻度，搖勻， 溶液濃度為0.2 g·L-1 。吸取標準溶液0mL、1.00mL、 2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL和6.00mL（相當于蘆丁含量 0mg、0.2mg、0.4 mg、0.6mg、0.8mg、1.0 mg 和1.2 mg），分別置于50 mL容量瓶中，向容量瓶中加入1.0mL硝酸鋁溶液和1.0mL醋酸鉀溶液，用95%乙醇定容至刻度，搖勻，靜置10 min后測定。
結果計算
總黃酮計算公式為
式中：X 為黃酮類化合物的總含量，%；
m1 為 由標準曲線上查出測定液中蘆丁質量，mg；
m 為樣品的質量，g；
d 為稀釋比例。
儀器參數(shù)
UV-1800PC雙光束紫外可見分光光度計
儀器特點
* UV－1800系列采用雙光束光學系統(tǒng)，成功實現(xiàn)了高精度和高可靠性測量的完美結合，可滿足各種應用的要求，可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學研究、環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗、衛(wèi)生防疫等領域
* 寬廣的波長范圍，可滿足各個領域對波長范圍的要求
* 全自動的設計理念，實現(xiàn)了最簡單的測量手段
* 大規(guī)模集成電路的設計大大提高了系統(tǒng)的擴展性和可靠性
* 改良優(yōu)化的光路設計、進口光源和接收器造就了系統(tǒng)高性能和高可靠性
* 豐富的測量方法，具有波長掃描、時間掃描、多波長測定、多階導數(shù)測定（選）、雙波長、三波長（選）DNA蛋白質測量（選）等多種測量方法，可滿足不同測量的要求，并可在6英寸大屏幕上直接顯示
* 根據(jù)用戶的要求可選配單孔架、手動四連架、手動八連架、自動八連架、玻璃支架、試管架、1cm比色架、5cm比色架、10cm比色架等
* 測量數(shù)據(jù)可通過打印機輸出，具有USB接口
* 可斷電保存測量參數(shù)和數(shù)據(jù)，方便用戶使用
* 可通過PC軟件控制實現(xiàn)光譜掃描等更精確和靈活的測量要求
技術指標及基本參數(shù)
* 波長范圍：190～1100nm
* 光譜帶寬：1.8nm
* 波長準確度：±0.3nm
* 波長重現(xiàn)性：≤0.1nm
* 透射比準確度: ±0.3% τ（0-100%τ）±0.002A(0～0.5A) ±0.003A(0.5A～1A)
* 透射比重復性：±0.15% τ（0-100%τ）±0.001A(0～0.5A) ±0.0015A(0.5A～1A)
* 雜散光：≤0.03% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)
* 穩(wěn)定性： 0.0005A/h（500nm預熱后）
* 測光方式：透過率、吸光度、濃度、能量
* 波長調節(jié)：自動調節(jié)
* 光度范圍： -4～4A
* 顯示方式：六英寸高亮度液晶顯示屏
* 檢測器：進口硅光二極管
* 光源：進口氘燈，進口鎢燈
* 電源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz
* 功率： 120W
* 儀器尺寸：560×450×230mm
* 主機凈重： 28Kg
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上海美析儀器公司簡介
上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析)，是一家具有自主知識產(chǎn)權的高新技術企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測試儀器領域，不斷開發(fā)出先進的產(chǎn)品，使美析成為優(yōu)質儀器資源的供應者。
美析主營光譜類儀器可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計、原子熒光光度計、ICP 電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP 電感耦合等離子體質譜儀，目前，我們的產(chǎn)品已廣泛應用于有機化學、無機化學、生物化學、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等領域。同時美析利用在產(chǎn)品機械結構、光學設計、電氣應用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗，結合市場的最新實際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。美析的總部及生產(chǎn)基地設在上海，營銷中心設在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國內外的部分科研單位也進行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉化為生產(chǎn)力。為更好的服務于廣大客戶，美析儀器國內設有 12家辦事機構，度身定制符合您需求的應用解決方案，提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務國內用戶的同時，美析也與 20 多個國家的分銷機構建立了深度的戰(zhàn)略合作關系。
